灵芝体外精子营养液：纯天然成分，增强精子活力的新选择

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专利名：一种灵芝体外精子营养液的制备方法及其制备方法和应用

技术领域：

本发明涉及一种精子营养液，特别涉及一种灵芝体外精子营养液及其制备方法和应用。

技术背景：因精子活力低而不能受孕的不育患者在不育患者中占很大比例，治疗该类不育症的口服药物种类繁多，但无论是西药还是中药，其疗效都较差，有的患者甚至需要口服数年才见效，给患者造成很大的经济负担和心理压力，且容易出现各种不适，对患者的身体健康造成一定的影响。为此，近年来国际上开始研究利用精子营养液对患者精子的活力进行体外培养，最终达到增强精子活力的目的。目前，我国所用的营养液均为进口产品，价格昂贵，且这些营养液一般含有化学药物成分，但该领域研究的最终目的是利用纯天然物质。发明内容本发明的目的是提供一种灵芝体外精子营养液及其制备方法和应用。本发明采用纯天然材料灵芝为原料，提取其中的多糖制成精子营养液，以达到体外激活精子，增强精子活力的目的。为了达到上述目的，本发明通过如下技术方案实现一种灵芝体外营养液。

精子营养液是由灵芝原料提取的多糖与生理盐水混合的液体，灵芝多糖与生理盐水的比例为1g灵芝多糖对10ml生理盐水。灵芝体外精子营养液的制备方法，包括以下步骤：取灵芝原料，洗净，在50℃～65℃下干燥1.5～2.5小时，然后粉碎，放入0.8％生理盐水中浸泡0.8～1.5小时，灵芝原料与生理盐水的比例为100g：900～，然后将浸泡液置于容器中，在95～105℃下加热，取出，过滤，去渣，即得灵芝提取物；将灵芝提取物在50℃～60℃下干燥1.5～2.5小时，即得干燥品；按100g干物质与250mm石油醚的比例将干物质置于容器中，在60℃～90℃回流1小时脱脂，过滤，回收石油醚；滤渣蒸干溶剂后，用220～260ml 80％乙醇浸泡10～15小时，在80℃～90℃回流提取两次，每次1～2小时，得滤液和滤渣；滤渣用蒸馏水浸泡0.8～1.2小时后，在90℃温浸30～48分钟，过滤，得滤液和滤渣；将滤渣在90℃的220-260ml蒸馏水中温浸25-35分钟后，过滤，得滤液；合并上述滤液，减压浓缩至75ml，除去蛋白质，加1％活性炭脱色2次，抽滤，向滤液中加入95％乙醇使醇含量达80％，在4-12℃放置10-15小时，过滤；再依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤残渣，然后在50℃加热

-60℃干燥，得到灵芝粗多糖；再用蒸馏水洗脱纤维素柱，对灵芝粗多糖进行分离纯化，得到灵芝多糖组分；然后用0-0.2mol/L氢氧化钠进行梯度洗脱，收集多糖洗脱液，在流水中透析68-76小时，真空冷冻干燥，得到灵芝多糖；按照1克精制灵芝多糖与10毫升生理盐水的比例混合均匀，配制成灵芝多糖精子营养液。将浸泡液放入容器中加热浸泡10-45分钟。灵芝原料与生理盐水的比例为100g：。灵芝体外精子营养液的使用方法是将灵芝精子营养液与精液按液量i:i混合，混合均匀，用于培养精子和激活精子。本发明所用的灵芝原料是一种食用菌和药用菌。-灵芝具有滋补、健脑、强壮、消炎、利尿、益胃等功效。药理研究表明，灵芝具有强心、保肝、镇静等作用。灵芝含有多糖、生物碱、固醇、酚类、氨基酸、甘露醇、氯氰菊酯、内酯、香豆素等。医学研究表明，灵芝安全无毒，无副作用，具有抑制肿瘤、调节免疫功能、核酸合成代谢、改善微循环、降血压、降血脂、清除自由基等作用。进一步研究表明，灵芝中的多糖和氨基酸能提高精子的活性。本发明以灵芝为精子体外培养液原料，制备的精子培养液经实验证明能提高精子活性率35-56%，延长精子体外存活时间

该产品使用时间24～28小时，对精子无损伤，无任何毒副作用，完全可以替代进口产品，且价格大大低于进口产品，为我国不孕不育患者提供了一种经济实用、安全有效的产品。

详细描述

实施例本发明的灵芝体外精子营养液为由灵芝原料提取的多糖与生理盐水混合的液体，其中灵芝多糖与生理盐水的比例为1克灵芝多糖对10毫升生理盐水。灵芝体外精子营养液的制备方法是取灵芝为原料，洗净后在60℃下烘干2小时，然后粉碎，放入0.8％生理盐水中浸泡1小时，其中灵芝原料与生理盐水的比例为100g：900～1150毫升，可以为100g：900毫升、100g：1150毫升或100g：1100毫升等，优选的方案是原料灵芝与生理盐水的比例为100g：100毫升。然后将浸泡液放入容器中加热至100℃，取出后过滤，去渣，即得灵芝提取物；将灵芝提取物在60℃下干燥1小时，即得干燥品；将干燥品按100g干燥品与250mm石油醚的比例放入容器中，在60℃-90℃下回流1小时脱脂，过滤，用石油醚回收，然后将滤渣蒸去溶剂后放入250ml 80％乙醇中浸泡10小时、12小时或15小时，在80℃-90℃下回流提取2次，每次1.2小时，即得滤液和滤渣；然后将滤渣放入毫升蒸馏水，优选500ml中浸泡0.8-1.2小时，再在90℃温浸40分钟，过滤，得滤液和滤渣，再将滤渣在250ml蒸馏水中在90℃温浸30分钟，过滤，得滤液；将以上滤液合并，减压浓缩至75ml，除去蛋白质，加1％活性醇脱色2次，抽滤，滤液中加入95％乙醇，使醇含量达80％，在4-12℃下静置10-15小时，过滤。残渣再依次用95%乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤，然后在60℃下干燥，得到灵芝粗多糖。对灵芝粗多糖进行分离纯化，用蒸馏水洗脱纤维素柱，得到灵芝多糖组分。然后用0.0-2mol/L氢氧化钠进行梯度洗脱，收集多糖洗脱液，在流水中透析68-76小时。真空冷冻干燥后，得到精制的灵芝多糖；按照1克精制的灵芝多糖与10毫升生理盐水的比例混合均匀，即为灵芝多糖精子营养液。本发明的浸泡液优选在容器中加热10至45分钟。本发明的灵芝体外精子营养液的应用是将灵芝精子营养液与精液按照液体体积1：1的比例均匀混合，用于培养精子、激活精子，达到本发明的效果。

索赔

1.一种灵芝体外精子营养液，其特征在于：它是由灵芝原料中提取的多糖与生理盐水混合的液体，灵芝多糖与生理盐水的比例为1克灵芝多糖：10毫升生理盐水。

2.根据权利要求 1所述的灵芝体外精子营养液的制备方法，其特征在于：将灵芝原料洗净，在 50°C-65°C下干燥 1.5-2.5小时，然后粉碎，放入0.8%生理盐水中浸泡 0.8-1.5小时，灵芝原料与生理盐水的比例为 100g: 900-，然后将浸泡后的溶液放入容器中加热至 95-105°C，取出过滤，除去残渣，即得灵芝提取物；将灵芝提取物在 50°C-60°C下干燥 1.5-2.5小时，即得干燥品；按100g干燥品与250mm石油醚的比例将干燥品置于容器中，在60℃～90℃回流1小时脱脂，过滤，回收石油醚；滤渣蒸干溶剂后，用220～260ml 80％乙醇浸泡10～15小时，在80℃～90℃回流提取两次，每次1～2小时，得滤液和滤渣；滤渣用450～550ml蒸馏水浸泡0.8～1.2小时后，在90℃温浸30～48分钟，过滤，得滤液和滤渣；将滤渣放入220～260ml蒸馏水中，在90℃温浸25～35分钟，过滤，得滤液；合并以上滤液，减压浓缩至75ml，除去蛋白质，加1％活性炭脱色2次，抽滤，向滤液中加入95％乙醇使醇含量达80％，在4～12℃放置10～15小时，过滤；再依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤滤渣，在50～60℃干燥，得灵芝粗多糖；再将灵芝粗多糖分离纯化，用蒸馏水洗脱，得灵芝多糖组分；然后以0～0.2mol/L氢氧化钠进行梯度洗脱，收集多糖洗脱液，在流水中透析68～76小时，真空冷冻干燥后即得精制灵芝多糖；按照1克精制灵芝多糖与10毫升生理盐水的比例，混合均匀，即制成灵芝多糖精子营养液。

3.根据权利要求2所述的灵芝体外精子营养液的制备方法，其特征在于：将浸泡溶液在容器内加热，加热时间为10-45分钟。

4.根据权利要求2所述的灵芝体外精子营养液的配制方法，其特征在于：灵芝原料与生理盐水的比例为100g：。

5.根据权利要求1至4任一项所述的灵芝体外精子营养液的用途，其特征在于将灵芝精子营养液与精液按液体体积1:1的比例均匀混合，用于精子的培养和激活。

全文摘要

本发明公开了一种灵芝体外精子营养液及其制备方法和应用。所述液体为灵芝原料提取的多糖与生理盐水的混合物，灵芝多糖与生理盐水的比例为1克灵芝多糖：10毫升生理盐水。制备方法是取灵芝原料，洗净、干燥、粉碎，浸泡在生理盐水中，然后将浸泡液放入容器中，加热至95-105℃，过滤后即得灵芝提取物；所述灵芝体外精子营养液的应用是将灵芝精子营养液与精液按液体体积比1：1混合，用于培养和激活精子。本发明可使精子活动率提高35-56％，且对精子无损伤，无毒副作用，其效果完全替代进口产品，而价格较进口产品大大降低。

文件编号/

公开日期 2008 年 4 月 2 日 申请日期 2007 年 9 月 27 日 优先权日期 2007 年 9 月 27 日

发明人：李新颖、王雷光、王素梅、易秋 申请人：山东省计划生育科学技术研究所